-
人参（Panax ginseng C.A.Meyer）为五加科人参属多年生草本植物，其干燥根是我国名贵的中草药[1]。人参种植主要分布在中国、韩国及朝鲜等地，吉林省东部是我国人参主产区[2]。伐林栽参是人参的主要栽培模式，严重破坏了生态平衡，现在国家严令禁止伐林栽参，近几年，栽培模式逐渐转向农田栽参[3]，农田土栽参的关键技术是土壤改良，人参的生长和品质形成对土壤环境要求严格，而普通农田土（前茬作物是玉米、大豆等）存在土壤容重低、易板结、养分低、次生盐渍化等问题[4-5]，有学者通过绿肥作物间作或轮作改良土壤质量，有效提高了人参的产量和皂苷含量[6]。人参根系与根际土壤微生物的相互影响作用被广泛关注。木霉菌（Trichoderma spp.）是一类土壤中广泛存在的真菌，适应性强，通过拮抗其他植物病原菌抑菌，从而有效防治多种植物病害。木霉是最常用的生防真菌之一，如 T. virens、T. atoviride、 T. harzianum[7-9]。人参栽培土壤中存在丰富的木霉菌资源，目前木霉菌生物菌肥已成为研究热点，为了进一步探索不同木霉菌对人参栽培土壤理化性质及微生物群落结构组成的影响，本研究以添加不同外源木霉菌处理栽培人参土壤为研究对象，通过土壤理化性质的不同以及利用 ITS 序列高通量测序技术研究不同木霉菌对农田土壤组成、真菌微生物群落结构的影响，旨在为人参栽培土壤改良技术和人参连作障碍提供科学依据和理论指导。
-
1 材料与方法
-
1.1 木霉菌株的获得
-
木霉菌株均由中国农业科学院特产研究所提供，于吉林省长白市抚松县万良镇地区采集的人参根部分离获得，经过形态学和分子生物学鉴定：依次为哈茨木霉菌株 MM6、钩状木霉菌株 MM3、 MM4、DH3、Q7。钩状木霉 MM3、哈茨木霉 MM6 已保存在中国普通微生物菌种保藏中心，保藏编号分别是 CGMCC NO.：19937、CGMCC NO.：19938； 钩状木霉 MM3 菌株已经获得专利，授权专利号是 ZL202011023723.5。将菌株在 PDA 培养基活化，于 25℃恒温培养，备用。
-
将菌株接种在 90 mm PDA 平板上，7 d 后待孢子长满板加入适量无菌水轻轻将孢子洗下，将孢子悬浮液分散至 6 g/L 羧甲基纤维素钠（CMC）溶液中，获得孢子悬浮液，孢子含量为 1×107 个 /mL。
-
1.2 试验设计及土壤样品的准备
-
将农田土（未栽参的普通玉米田土壤，使用前用 0.25 mm 网筛筛除秸秆石头等杂质）装入直径为 20 cm 的花盆中，选择大小一致且生长良好的一年生人参幼苗进行移栽，每盆 6 株，6 个处理 [ 即 MM3、MM4、DH3、Q7、MM6 的孢子悬浮液以及无菌水对照（CK）]，每个处理 3 次重复。将制备好的孢子悬浮液用无菌水稀释 50 倍液，人参幼苗先用孢子悬浮液蘸根处理，培土栽好后取 30 mL 孢子悬浮液灌根处理。盆栽放置人工气候室内，温度为 17~28℃，相对湿度为 70%~80%，定期浇水。
-
从 2019 年 10 月至 2020 年 3 月，盆栽人参的一个生育期结束，收集每棵人参的根际土，每盆的根际土混和为一次重复。所有土壤样品一部分用于理化指标分析，另一部分留存在-80℃超低温冰箱中，用于土壤微生物总基因组提取鉴定。
-
1.3 测定指标及方法
-
土壤 pH 值采用 pH/ORP 酸度计测定；土壤全碳、全氮含量采用土壤碳氮元素分析仪测定；铵态氮、硝态氮通过连续流动分析仪（SEAL AA3）测定；全磷采用碱熔-钼锑抗比色法测定[10]；有效磷采用 NaHCO3 浸提法测定；速效钾采用火焰光度法测定[11]。
-
1.4 土壤真菌的高通量测序
-
称取 0.2 g 土壤样品，按照土壤基因组 DNA 提取试剂盒（天根生化科技有限公司，DP812）完成核酸的提取，通过酶标仪（synergy HTX）检测 DNA 浓度。真菌核糖体编码基因相应区段的扩增及高通量测序服务由百迈克生物科技有限公司独立完成[12]，真菌多样性测序基于 Illumina NovaSeq 平台测定。
-
1.5 数据统计和分析
-
数据统计和相关性分析通过 Excel 2013 和 SAS 9.0 完成；对测序得到的 Raw Reads 进行质量过滤，使用 Cutadapt（V1.9.1）进行引物序列的识别和去除，通过 overlap 进行双端序列拼接，使用 UCHIME V8.1 鉴定并去除嵌合体，得到高质量数据。按照相似性 97% 进行聚类分析（UP⁃ARSE pipeline，V7.0），将聚类结果同物种注释结合起来，最终结果显示出样品的 OTUs 和分类谱系[13]。 Alpha 多样性指数分析：通过 QIIME2 计算 Shannon、 Chao1 等多样性指数；通过 Canoco 5.0 进行理化因子和微生物多样性的冗余分析；采用 SPSS 23.0 进行 Spearman 相关性分析。
-
2 结果与分析
-
2.1 土壤理化性质
-
不同木霉菌处理的土壤种植人参经过一个生育期后，土壤样品理化性质见表1。不同木霉菌处理的土壤 pH 和有机质含量与 CK 无明显差异。添加木霉菌（DH3、MM3、MM4、MM6 和 Q7）处理的土壤全氮含量均高于普通农田土 CK 处理（P<0.05）。不同木霉菌处理碳氮比（C/N） 显著低于 CK （P<0.05）；5 种处理土壤铵态氮、硝态氮含量均高于 CK，其中 MM3、MM6 差异显著，MM6 的铵态氮含量最高，MM3 的硝态氮含量最高；处理组的有效磷和速效钾含量与 CK 差异显著，均高于 CK， MM4 处理的有效磷和速效钾含量最高，DH3 和 MM3 次之。结果表明，栽培人参过程中，不同木霉菌处理能够改变土壤理化性质，使土壤中 C/N 下降，钩状木霉和哈茨木霉能提高土壤中的全氮、铵态氮、硝态氮、有效磷以及速效钾含量。
-
2.2 测序数据分析
-
2.2.1 不同木霉菌处理下土壤真菌 OTU 水平分析及多样性分析
-
以不同生防菌处理的 18 个人参根际土壤样品为研究对象，真菌 ITS 区段测序得到 1440831 个双端 reads。以 97% 相似性等参数评估，过滤处理获得高质量序列，过滤嵌合体后 ITS1 测序分析共得到 1410388 条序列，单个土壤样品变化范围为 70607～79397 条，以上序列被保留用作进一步分析。所有样品 ITS1 测序一共得到 703 个 OTUs，不同样品 OTU 数目变化范围为 241～405 个。
-
注：小写字母不同表示处理间差异显著（P<0.05）。下同。
-
从图1 中可看出，随着测序量的增加，所有样品的稀释曲线呈先上升后趋于平缓的趋势，当序列数目大于 25000 条后进入平台期，说明测序数据量合理，测序深度足够覆盖土壤样品中的真菌群落。不同处理下土壤真菌群落的 Alpha 多样性表现出不同差异，Chao1 和 ACE 指数反映物种丰富度，从表2 看出，两项指数除 Q7 与 CK 差异较小外，MM3、MM6、DH3、MM4 的土壤样品真菌物种丰富程度高于 CK，其中 Chao1 指数差异性显著；Simpson 和 Shannon 指数用于衡量菌群多样性，指数越大，菌群多样性越高。表2 的数据显示，MM3、MM6、Q7 土壤样品的真菌菌群多样性较高，DH3 和 MM4 的真菌菌群多样性低于普通农田土。
-
图1 不同处理土壤真菌的稀释曲线
-
2.2.2 不同木霉菌处理下土壤真菌群落结构特征
-
ITS1 所有序列中，除少数未知真菌序列未被分类外，在门的水平上以子囊菌门（Ascomycota） 所占比例最大，为 50.36%~67.47%，余下依次分别为被孢霉菌门（Mortierellomycota）（5.12%~31.70%）、担子菌门（Basidiomycota）（4.86%~10.28%）、壶菌门（Chytridiomycota）（0.61%~5.76%）和球囊菌门 （Glomeromycota）（0.30%~3.01%）。在纲的水平共鉴定 26 纲，前 6 位依次为粪壳菌纲（Sordariomycetes） （31.09%～61.77%）、被孢霉纲（Mortierellomycetes） （5.12%～31.70%）、银耳纲（Tremellomycetes） （0.74%～5.24%）、散囊菌纲（Eurotiomycetes） （2.90%～6.60%）、伞菌纲（Agaricomycetes） （0.67%～9.54%）、锤舌菌纲（Leotiomycetes） （1.19%～2.16%）。在目的水平上，共鉴定 46 目，大于 1% 的序列共 22 个目。在科水平上，共鉴定 86 科，大于 1% 的序列共 27 个科。在属水平上，共鉴定 141 属，大于 1% 的序列共 17 个属。
-
添加外源木霉菌后，栽培人参土壤微生物群落发生变化明显，在门的分类水平下，以子囊菌门为优势菌群，不同木霉菌处理土壤样品相对丰度均高于 CK，MM6 处理的相对丰度最高（图2a）；在属水平上（图2b），木霉菌处理组和 CK 的共同优势真菌为被孢霉属（Mortierella），CK 的相对丰度较高的优势真菌分别为乳菇属（Lactarius）、圆孢霉属（Staphylotrichum）、镰刀菌属（Fusarium）；处理组与 CK 相比较相对丰度差异较大的优势真菌分别为木霉菌属（Trichoderma）、腐质霉属（Tausonia、 Humicola）。
-
图2 不同处理中真菌门水平和属水平系统分类
-
2.2.3 不同样品中真菌群落结构的多样性分析
-
根据 18 个土壤样品中不同真菌 OTU 的丰度值，利用非度量多维尺度法（NMDS）通过降维排序方法进行多样性分析。结果显示，钩状木霉 MM3、MM4 和哈茨木霉 MM6 的距离相对较近，说明 3 种木霉菌处理的土壤真菌群落结构最为相似，与普通农田土位点相距较远，菌群结构存在明显差异；Q7 处理的土壤样品距离其他木霉菌处理的土壤样品距离较远，说明 Q7 与其他处理的真菌群落结构差异较大。在 NMDS 可信度检验中， Stress=0.1541，说明此分析结果（图3）可信。
-
图3 不同样品中真菌群落多样性的 NMDS 分析
-
2.2.4 不同样品中组间真菌显著差异物种分析
-
以所有样品的根际真菌类群为研究对象，利用 LDA Effect Size（LEfSe）在不同组间不同分类水平分析具有统计学差异的微生物物种（图4）。MM3 处理中的标志性种群包括肉座菌科（hypocreaceae） 和木霉菌属（Trichoderma），MM4 处理中的标志性种群是腐质霉属（Humicola），MM6 处理中的标志性种群是毛壳菌科（Chaetomiaceae），CK 的标志性种群是乳菇属（Lactarius）。
-
2.3 土壤理化性质与微生物多样性的关联性分析
-
对土壤理化因子与真菌门分类等级开展冗余分析（ 图5），Axis1 和 Axis2 共同解释了变量的 41.2%，前 4 个 Axis 解释度达到 98.98%，两个轴能够反映土壤理化因子对土壤真菌群落的影响。结果表明，C/N、硝态氮含量与真菌 Ascomycota、 Basidiomycota 相关，其中 C/N 与 Basidiomycota 呈显著正相关，与 Ascomycota 呈显著负相关；硝态氮与 Chytridiomycota 呈显著正相关，与 Basidiomycota、 Mortierellomycota 呈显著负相关；以上土壤理化因子和真菌群落的关系受添加不同种类木霉菌影响。
-
为探究土壤理化性质与土壤真菌群落组成之间的关系，对相对丰度前 20 位的真菌菌属和土壤环境因子测定值进行了相关性分析（图6），结果表明，刺球菌属（Chaetosphaeria）与土壤全氮含量呈显著正相关，与 C/N 呈显著负相关；Tausonia 和镰刀菌属（Fusarium）与土壤速效钾含量呈显著正相关；Arcopilus 与土壤全磷含量呈负相关，与土壤速效钾含量呈显著正相关；青霉菌属（Penicillium） 和毛壳菌属（Chaetomium）与土壤 C/N 呈负相关； 乳菇属（Lactarius）、类球囊霉属（Paraglomus）、圆孢霉属（Staphylotrichum）与有效磷含量呈负相关。
-
图4 LEfSe 分析进化分枝图
-
图5 人参土壤真菌与土壤因子的冗余分析
-
图6 环境因子与土壤真菌属水平的相关性热图
-
3 讨论
-
人参栽培过程中土壤改良是关键，土壤理化性质可以反映栽参土壤的质量[2]。土壤肥力指标的变化对于人参的产量和品质具有一定影响[4]。在植物的整个生长阶段，氮元素至关重要，是构成蛋白质的主要成分。吕曼曼等[14]从土壤中发现一株木霉菌——棘孢木霉，其分生孢子诱导能显著提高栽培一年生杨树苗盆土的总氮量。本研究中，木霉菌处理后人参土壤全氮量均增加，木霉菌菌种不同，增加程度不同。土壤中的有机碳和氮素是植物生长的主要营养来源，被作为土壤肥力评价和土地可持续利用评估的重要参考指标[15-16]；人参的整个生长周期都在不断吸收土壤中养分，减少了微生物可利用碳源，导致有机质含量发生变化。添加木霉菌处理后，C/N 下降，木霉菌影响土壤微生物群落结构，低的 C/N 可以加快微生物分解和氮的矿化速率，高的 C/N 会限制土壤微生物的活动能力，减慢土壤有机质和氮的分解矿化速度[17]。
-
土壤中氮元素的存在形式主要分为铵态氮和硝态氮，决定植物的生长和生态系统生产力。土壤中硝态氮的含量逐渐降低，说明硝态氮是人参生长过程中的一种重要营养物质[18]。本研究中木霉菌处理的土壤硝态氮、铵态氮含量均高于 CK，可能是木霉菌的添加使土壤微生物多样性发生变化，从而影响了人参土壤中氮的硝化、氨化作用。土壤理化因子受人参栽培年限以及移栽模式不同的影响[19]，添加外源木霉菌，植物根系与木霉菌分泌的代谢产物互作，也可以改变土壤理化性质和营养成分[20]。功能性木霉菌是一种潜在、有效的土壤改良菌株，可以改良土壤物理性状、提高微生物群落数量、促进化学物质的可溶性。土壤真菌群落结构受农田栽培管理模式和种植作物的影响，不同处理条件下土壤微生物真菌群落组成和丰度均有较大变化[21]。通常情况下，土壤真菌的丰富度越高，功能性物种越多，土壤环境生物生长过程尤为重要，微生物组成结构的变化可能会改变土壤性质和植物生长。木霉生物有机肥除了对作物有促生作用外，还能够激发土壤中其他功能微生物的生长[20]。Xiao 等[22]发现人参土壤中 Hypocreales 和变形菌门（Proteobacteria） 占主导地位。Huang 等[23] 发现通过短密木霉（T. brevicompactum）能够抑制白术根腐的发生，调节土壤真菌群落结构；人参根际土壤中微生物的种类各不相同，本研究发现，处理组与 CK 相比较相对丰度差异较大的优势真菌为 Trichoderma、Tausonia、 Humicola。Humicola 存在于有机质丰富的土壤中，能够产生木质素酶、葡萄糖异构酶、纤维素酶等，其代谢产物具有实用价值，在堆积发酵、酒曲生产等过程中发挥重要的生物转化功能[24]。施用外源短密木霉菌（T. brevicompactum）检测到其根际土壤的优势真菌为木霉菌属（Trichoderma）、Sordariomyetes、青霉菌属（Penicillium），可以增加优势菌的丰度[25-26]。本研究中，哈茨木霉处理组的标志性种群是毛壳菌科，该菌群属于营腐生类真菌，是有较强分解纤维素能力的类群[27]；有报道称该菌群为植物病原菌的拮抗菌[28]，在拮抗人参病害方面还需要进一步验证。钩状木霉 MM3 注释出的标志性种群为肉座菌科（hypocreaceae）（相对丰度 22.6%）、木霉菌属（Trichoderma）（相对丰度 21.9%）占 96.9%，与 Huang 等[23]的研究结果相似。外源木霉菌的介入能够改变土壤微生物群落结构，不同种对具体功能菌群的影响有差异，其中钩状木霉 MM3 和哈茨木霉 MM6 在提升土壤真菌群落多样性方面具有一定的优越性，有利于一些有益木霉菌属真菌的生长。
-
4 结论
-
添加不同外源木霉菌处理的栽参土壤全氮量、 C/N、铵态氮、硝态氮、有效磷、速效钾含量均差异显著，这种环境因子的变化进一步影响土壤真菌群落多样性及功能特性。不同木霉菌处理的农田土壤微生物群落结构不同，5 种木霉菌处理的人参土壤功能微生物的地位及多样性的改变均与土壤环境因子有关，其中钩状木霉 MM3 在提升土壤真菌群落多样性方面具有一定的优越性。
-
参考文献
-
[1] 国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）［M］．北京：中国医药科技出版社，2015．
-
[2] 张连学，陈长宝，王英平，等．人参忌连作研究及其解决途径［J］．吉林农业大学学报，2008，30（4）：481-485．
-
[3] 沈亮，李西文，徐江，等．人参无公害农田栽培技术体系及发展策略［J］．中国中药杂志，2017，42（17）：3267-3274．
-
[4] Cui Y S，Lee S T，Im W T．Nocardioides ginsengisoli sp．nov．，isolated from soil of a ginseng field［J］．Int J Syst Evol Microbiol． 2009，59（12）：3045-3050．
-
[5] Vendan R T，Yu Y J，Lee S H，et al．Diversity of endophytic bacteria in ginseng and their potential for plant growth promotion ［J］．Journal of Microbiology，2010，48（5）：559-565．
-
[6] 梁从莲，沈亮，胡鑫．农田栽参土壤改良过程中绿肥作物筛选的研究［J］．中华中医药杂志，2020（5）：2282-2287．
-
[7] Benitez T，Rincon A M，Carmen L．Biocontrol mechanisms of Trichoderma strains［J］．International Microbiology，2004，7（4）：249-260．
-
[8] Shoresh M，Llarman GE，Mastouri F．Induced systemic resistance and plant responses to fungal biocontrol agent［J］． Annual Review of Phytopathology，2010，48（1）：21-43．
-
[9] Li H M，Ruey T，Wei Y L，et al．“Microbiomes across Root Compartments Are Shaped by Inoculation with a Fungal Biological Control Agent”［J］．Applied Soil Ecology：A Section of Agriculture，Ecosystems & Environment，2022（170）：104230．
-
[10] 国家林业局．中国林业土壤分析方法［M］．北京：中国标准出版社，1999：20-145．
-
[11] 鲍士旦．土壤农化分析［M］．北京：中国农业出版社，2008：30-108．
-
[12] Hanbo C，Paul C B．Venn Diagram：a package for the generation of highly-customizable Venn and Euler diagrams in R［J］．BMC Bioinformatics，2011，12（1）：35．
-
[13] Edgar，Robert C．“UPARSE：Highly accurate OTU sequences from microbial amplicon reads”［J］．Nature Methods．2013，10（10）：996-998．
-
[14] 吕曼曼，刘志华，王慧，等．棘孢木霉对杨树苗栽培土理化性质及养分的影响［J］．植物研究，2015，35（2）：289-296．
-
[15] 隋跃宇，张兴义，焦晓光，等．长期不同施肥制度对农田黑土有机质和氮素的影响［J］．水土保持学报，2005（6）：192-194，202．
-
[16] 张春华，王宗明，居为民，等．松嫩平原玉米带土壤碳氮比的时空变异特征［J］．环境科学，2011，32（5）：1407-1414．
-
[17] Springob G，Kirchmann H．Bulk soil C to N ratio as a simple measure of net N mineralization from stabilized soil organic matter in sandy arable soils［J］．Soil Biology&Biochemistry，2003，35：629-632．
-
[18] 李茜，徐瑞蔓，陈迪，等．不同栽培年限人参根际土壤细菌群落与土壤理化性质和酶活性的相关性［J］．植物营养与肥料学报，2022，28（2）：313-324．
-
[19] Wang Q X，Sun H，Li M J，et al．Different age-induced changes in rhizosphere microbial composition and function of Panax ginseng in transplantation mode［J］．Frontiers in Plant Science，2020，11：563240．
-
[20] 刘正洋，王若斐，乔策策，等．木霉生物有机肥对白菜和甘蓝产量及土壤微生物区系的影响［J］．南京农业大学学报，2020，43（4）：650-657．
-
[21] Wang Y，Xu J，Shen J H，et al．Tillage，residue burning and crop rotation alter soil fungal community and water-stable aggregation in arable fields［J］．Soil & Tillage Research，2010，107（2）：71-79．
-
[22] Xiao C P，Yang L M，Zhang L X，et al．Effects of cultivation ages and modes on microbial diversity in the rhizosphere soil of Panax ginseng［J］．Journal of Ginseng Research，2016，40（1）：28-37．
-
[23] Huang X G，Yan X N，Tang Y J，et al．Evaluaion the impact of Trichoderma brevicompactum 31636 on root rot of Atractylodes macrocephala and the fungal community in the rhizosphere soil［J］． Clinical Complementary Medicine and Pharmacology，2022，2（4）：100025．
-
[24] 武俊男，刘昱辛，周雪，等．基于 Illumina MiSeq 测序平台分析长期不同施肥处理对黑土真菌群落的影响［J］．微生物学报，2018，58（9）：1658-1671．
-
[25] Zhang C Q，Ma G S，Lian H，et al．Effect of Trichoderma on physiological characteristics of cucumber seedlings and control effect against Fusarium wilt［J］．Plant Protection，2018，44（5）：238-246．
-
[26] Xu C H，Zhang J T，Ye S P，et al．Isolation and identification of a phosphate solubilizing penicillium strain from soil and its application effect［J］．Chinese Soil and Fertilizer，2020（6）：272-278．
-
[27] 谭悠久，张荣，张军林，等．中国毛壳菌科（Chaetomiaceae）分类研究［J］．西北农林科技大学学报（自然科学版），2005（S1）：267．
-
[28] 莫维弟，卯婷婷．辣椒枯萎病土壤拮抗真菌的筛选与鉴定 ［J］．贵州农业科学，2019，47（8）：66-70．
-
摘要
为研究不同木霉菌对栽培人参土壤的改良作用，分析木霉菌对土壤养分和土壤真菌群落结构与功能特征的影响。采用人参盆栽试验，添加外源木霉菌（钩状木霉 DH3、MM3、MM4、Q74 种菌株和哈茨木霉 MM6 菌种） 后，分析土壤理化性质以及土壤微生物群落多样性变化。添加不同外源木霉菌处理后人参土壤理化性质发生变化，土壤 pH 值无显著变化，土壤全氮、有机质、铵态氮、硝态氮、有效磷、速效钾含量显著增加（P<0.05），而碳氮比（C/N）在添加木霉菌处理中降低，其中钩状木霉 MM3 和哈茨木霉 MM6 两株菌的理化性质表现最好。ITS 测序分析获得 703 个 OTUs，涵盖了 8 门、26 纲、46 目、86 科、141 属。木霉菌处理后土壤真菌微生物 α 多样性指数 （ACE、Chao1）增加，尤其是钩状木霉 MM3；钩状木霉 MM3 中的主要特征种群是肉座菌科（Hypocreaceae）和木霉菌属（Trichoderma），哈茨木霉 MM6 的主要特征种群是毛壳菌科（Chaetomiaceae）。冗余分析（RDA）发现，土壤 C/ N 和硝态氮是影响土壤环境中微生物多样性的主要因素；相关分析表明，刺球菌属（Chaetosphaeria）与土壤全氮含量呈显著正相关，与 C/N 呈显著负相关。本结果为栽培人参土壤微生物改良和生物防治提供理论依据。
Abstract
Exploring Trichoderma like biological fungal fertilizer in soil improvement has become a research focus. In order to study the improvement effect of different Trichoderma spp. on soil of ginseng cultivation，the soil physicochemical properties， and soil fungal community structure and function were analyzed. Ginseng pot experiment was conducted to analyze soil physical and chemical properties and soil microbial community diversity in which exogenous Trichoderma strains（four strains of T. hamatum DH3，MM3，MM4，Q7 and one strain of T. harzianum MM6）were added. The results showed that the soil physicochemical properties of Panax ginseng were changed by different exogenous Trichoderma strains. The soil pH did not change significantly，and the total nitrogen，organic matter，ammonium nitrogen，nitrate nitrogen，available phosphorus and available potassium were increased significantly（P< 0.05），while soil carbon nitrogen（C/N）ratio was decreased in the treatments with addition of Trichoderma strains. Generally speaking，the soil physicochemical properties treated by T. hamatum MM3 and T. harzianum MM6 were the best. Using Illumina NovaSeq high-throughput sequencing platform， the sequence of ITS variation region of soil fungi was determined，and 703 OTUs were obtained from all samples．Fungal species detected in these samples covered 8 phyla，26 classes，46 orders，86 families and 141 genera．The soil fungi α diversity index（ACE，Chao1）increased，especially in the treatment of T. hamatum MM3. The dominant fungal community were Hypocreaceae and Trichoderma in the treatment of T. hamatum MM3，and were Chaetomiaceae in T. harzianum MM6. Redundancy analysis（RDA）ascertained that soil C/N ratio and nitrate nitrogen were the main factors affecting the soil microbial diversity. The study provided theoretical basis for soil microbial improvement and biological control of cultivated ginseng.