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百合科葱属的大蒜（Allium sativum L.）在我国栽培历史悠久，在食品和医药领域有重要的价值[1]。我国大蒜生产规模稳步上升，随之而来的大蒜主产区连作现象也日益严重，导致大蒜生长势弱，产量和品质下降[2]，威胁到大蒜生产的可持续发展。
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植物根际促生菌（PGPR）能够促进植物生长并抑制有害生物[3]，其可以通过调节养分利用率 （溶磷[4]、解钾[5] 等）、分泌生长调节物质[6-7] 等直接促进植物生长，也可以通过招募有益微生物[8]、抑制病原菌[9]、改良土壤[10]、缓解微生物胁迫[11]等方法间接促进植物生长。PGPR 具有较强的植物定殖能力，利用其制备的微生物菌剂对土壤肥力有持续性改善作用，并且更加环保[12]，因此探讨 PGPR 菌剂改善大蒜连作问题有着很好的发展前景。目前已知芽孢杆菌属（Bacillus）的多种 PGPR 菌株通常具有固氮、溶磷、分泌铁载体等多种促生特性，且可以促进多种植物的生长[13]。芽孢杆菌能产生多种抑菌活性物质（脂肽类抗生素、拮抗蛋白物质），可有效抑制多种植物病原菌[14-15]。
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芽孢杆菌科芽孢杆菌属的暹罗芽孢杆菌 （Bacillus siamensis）于 2010 年作为新种被收录于刊物《International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology》[16]。近年有关暹罗芽孢杆菌的研究证实，暹罗芽孢杆菌对花生白绢病[17]具有良好的生防效果；两株暹罗芽孢杆菌 WM13-1、WM35-1 对烟草黑胫病菌（Phytophthora nicotianae）抑菌率较高，且对玉米大斑病菌（Exserohilumt urcicum）、烟草枯萎病菌（Fusarium redolens）、石榴干腐病菌（Phomopsis sp.）、油菜核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）具有良好的抑菌效果[18]；暹罗芽孢杆菌 LZ88 对链格孢菌（Alternaria alternata）引起的烟草赤星病有抑制作用，并且可以抑制烟草黑胫病菌（Phytophthora parasitica var. nicotianae）、棒孢霉菌（Corynespora sp.）、葡萄炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）等病原菌的生长[19]；暹罗芽孢杆菌对镰刀菌属的部分菌株拮抗作用较强，如禾谷镰刀菌（Fusarium graminearum）[20]、茄病镰刀菌（Fusarium solani）、尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）[21]等。暹罗芽孢杆菌在作物栽培上具有促进作用，Pastor-Bueis 等[22]使用暹罗芽孢杆菌研制生物肥料，施用后提高了作物的氮利用率和产量； 温室接种试验证明，暹罗芽孢杆菌 H30-3 可促进植物生长，并缓解干旱和热胁迫对大白菜的影响[23]。
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筛选多功能且可定殖于大蒜根部的 PGPR 暹罗芽孢杆菌 37402-1，探索其抗病和促生机理，研制高效防控大蒜土传病害的微生物肥料，对我国大蒜产业可持续发展和绿色发展有着重要的生态学和现实意义。
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1 材料和方法
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1.1 供试材料
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供试菌株为实验室前期于山东省金乡县胡集镇连作大蒜根际土分离保藏的微生物资源。大蒜根腐病病原真菌尖刀镰孢菌 ACCC37402 和拟枝孢镰刀菌 ACCC36464 由中国农业微生物菌种保藏管理中心提供。
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1.2 培养基
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PDA 培养基：马铃薯 200 g，蒸馏水 1000 mL，煮熟后过滤留液体，葡萄糖 20 g，琼脂 18 g，蒸馏水 1000 mL，115℃灭菌 25 min，pH 7.0。
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牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏 3 g，蛋白胨 10 g， NaCl 5 g，琼脂18～20 g，蒸馏水 1000 mL，pH 7.0。
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蛋白酶检测培养基：蛋白胨 10 g，NaCl 5 g， CaCl2 0.1 g，脱脂奶粉 10 g，1.8% 琼脂，蒸馏水 1000 mL，115℃灭菌 30 min，pH 7.2～7.4。
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铬天青（CAS）培养基：CAS 检测液配置：溶液 A：将 0.06 g 的 CAS 溶于 50 mL 超纯水中，再加入 10 mL 1 mmol/L 的 FeCl3 溶液（ 含有 10 mmol/L 的 HCl）[1 mmol/L 的 FeCl3 溶液（ 含有 10 mmol/L 的 HCl）：稀释 12 mol/L 的浓盐酸至 12 mmol/L，称取 0.027 g FeCl3 溶解，加入 0.833 mL 12 mmol/L 的HCl，定容至 100 mL，即得 1 mmol/L FeCl3]；溶液 B：将 0.075 g 的十六烷基三甲基澳化铵溶于 40 mL 的超纯水中；溶液 C：将 A 溶液沿着烧杯的壁缓缓加入到 B 溶液中，轻轻晃动，使溶液 A、B 混匀，得到溶液 C 即 CAS 蓝色检测液。115℃灭菌 20 min。
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CAS 检测平板：配制好 1 mol/L 磷酸盐溶液 （使用时稀释 10 倍使用）：Na2HPO4·12H2O 2.427 g，NaH2PO4·2H2O 0.5905 g，KH2PO4 0.075 g，NaCl 0.125 g，NH4Cl 0.25 g，超纯水 100 mL，pH 6.5 左右。0.1 mol/L 磷酸盐溶液（1 mL 1 mol/L 磷酸盐溶液 +9 mL 超纯水）10 mL 与 6.04 g 哌嗪乙醇磺酸溶于 150 mL 超纯水，混匀后用 50%NaOH 将 pH 调至 6.8，加入琼脂 3.2 g。
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当以上的固体培养基以及各溶液灭完菌后，待温度都冷却至 60℃左右时，加入 0.2 mL 1 mmol/L 的 CaCl2 溶液，4 mL 1 mmol/L 的 MgSO4·7H2O 溶液， 2 mL 20% 葡萄糖溶液，6 mL 10% 酸水解酪蛋白溶液到 100 mL CAS 检测平板中，最后再取 5 mL CAS 蓝色检测液体沿三角瓶壁加入，混合均匀，切忌冒泡。
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无机磷培养基：KCl 0.2 g，NaCl 0.2 g，（NH4）2SO4 0.5 g，Ca3（PO4） 2 5.0 g，MgSO4·7H2O 0.1 g， FeSO4·7H2O 0.03 g，MnSO4·H2O 0.02 g，葡萄糖 10.0 g，蒸馏水 1000 mL，琼脂 20.0 g，pH 7～7.5。
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有机磷卵黄培养基：NaCl 5.0 g，牛肉膏 5.0 g，蛋白胨 10.0 g，蒸馏水 1000 mL，pH 7～7.5（临用时每 50 mL 中加入新鲜蛋黄液 3 mL，蛋黄液按无菌生理盐水与鸡蛋黄 1∶1 配置）。
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1.3 两点对峙试验方案
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以病原菌为指示菌，采用 PDA 平板对峙生长法。选用 PDA 平板，在距离平板中心 2 cm 的位置做上两点圆点标记，将大蒜土传根腐病的病原菌用打孔器打直径 5 mm 的菌饼，准确接在其中一点上，并取 2 μL 待测菌液接在另一点上。置培养箱中 28℃培养 7 d 后，观察实验结果，拍照记录实验数据，测定其抑菌率。抑菌率 =（对照病原菌菌落直径-处理病原菌菌落直径）/ 对照病原菌菌落直径 ×100%。
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1.4 菌株 16S rDNA 序列测定
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引物采用 16S rDNA 通用引物，由上海生工技术公司合成。27f：5′-AGAGTTTGATCCTGGCTC AG-3 ′，1492r：5 ′-TACGGTTACCTTGTTACGACTT-3 ′，采用 50 μL 聚合酶链反应（PCR） 反应体系 [2×Premix Taq（购自 TaKaRa 公司）25 μL，引物 （10 μmol/L）1 μL，模板 2 μL，用去离子水补足到50 μL 体系]。反应程序：95℃预变性 5 min、95℃ 变性 1 min、55℃退火 1 min、72℃延伸 2 min，35 个循环，最后 72℃再延伸 10 min，4℃保存。进行 PCR 扩增。反应完成后将样品送至上海生工技术公司测序，测序结果使用 EzBioCloud 数据库在线比对。
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1.5 菌株功能测定项目及方法
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1.5.1 产蛋白酶能力检测
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将待测菌株接种于蛋白酶检测培养基，置于 30℃培养 2 d。通过观察菌落周围是否产生透明圈判断菌株能否产生蛋白酶，通过观察透明圈的大小判断菌株水解蛋白质能力的强弱。
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1.5.2 产嗜铁素能力检测
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吸取 2 μL 待测菌液滴在 CAS 平板中心，并以无菌水作为对照，每组设 3 个平行，将平板置于 37℃恒温培养 2 d，若细菌菌落周围出现橙黄色晕圈，说明其具有分泌铁载体的能力，并可通过晕圈直径大小来判断菌株产铁载体能力的强弱。
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1.5.3 溶磷能力的测定
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吸取 2 μL 待测菌液接种于无机磷和有机磷培养皿中，每个处理设 3 个重复，置于 28℃下培养 10 d，观察接种菌株周围有无透明圈形成及其直径，以此判断该菌株有无溶磷性。
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1.6 温室大蒜促生试验方案
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处理为接种菌株 37402-1，对照不接菌。将菌株接种于液体牛肉膏蛋白胨培养基中，28℃、160 r/min 培养 2 d，发酵液浓度为 1.0×109～9.0×109 cfu/mL，保存备用。
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将草炭、蛭石、珍珠岩按体积比 3∶1∶1 混好，灭菌，按照比例混入氮磷钾元素，装到盆中，每盆 1 kg，浇透水备用。将大小一致的大蒜蒜瓣剥皮后，置于清水中浸泡 4 h 后，转入 4℃冰箱过夜放置后种于盆中，每盆 5 颗，处理和对照各 2 盆。待出芽期后，以灌根法[24]每盆分别接种菌液 50 mL，对照处理加 50 mL 无菌液体培养基。40 d 后，观察大蒜的长势和根长，测定其幼苗株高、地上地下部分鲜重、干重等指标，并使用 SPSS 25.0 单因素方差分析两个处理大蒜生理指标的差异显著性，分析细菌 37402-1 对大幼苗生长的影响。
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1.7 田间大蒜测产试验方案
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将纯化好的细菌 37402-1 接入牛肉膏液体培养基，12000 r/min、28℃连续培养 3 d，称取 200 g 草炭、100 g 蛭石、1 g 氨基酸、1 g 沸石粉、300 g 腐殖酸与 400 mL 菌液充分混匀，装入自封袋中备用，接种浓度约为 5×108 cfu/g。
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试验设 2 个处理：对照（不含拮抗菌，其余处理相同）、施拮抗菌剂 37402-1。于刚刚播种的大蒜地选取试验小区，每小区面积 6 m2，包含纵向 6 列大蒜，3 次重复，随机区组排列。拮抗菌剂于 2015 年 10 月 16 日一次施入，方法为相邻两排蒜之间开一条沟，将固体拮抗菌剂均匀撒入沟中，关沟。
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试验于 2016 年 5 月下旬收蒜时进行测产。分别按小区起蒜，称量每小区收获大蒜的重量，与对照进行比较，计算增产率。
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1.8 土壤酶活性分析
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1.8.1 土样采集与处理
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采样时间定于 2016 年 5 月，分别采集于 2015 年 10 月山东省金乡县的大蒜田地中施用微生物拮抗菌剂 37402-1 后的大蒜土壤样品。设 3 个重复，每个样品按蛇行法确定 5 个采样点，采集大蒜根部 5～10 cm 耕层土壤，将各采样点土壤混合均匀，留取约 1 kg 土样，在室内风干并过 0.15 mm 筛保存，用于土壤酶活性的测定。
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1.8.2 试验方法
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蔗糖酶活性测定：按照罗云莲[25]的方法测定土壤蔗糖酶活性。蔗糖酶活性以 24 h 后 1 g 土壤中葡萄糖的毫克数表示。葡萄糖（mg）=a×4，式中：a 为从标准曲线查得的葡萄糖毫克数；4 为换算成 1g 土的系数。
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过氧化氢酶活性测定：按照纪春涛[26]的方法测定土壤过氧化氢酶活性。土壤过氧化氢酶活性以单位土重消耗的 0.1 mol/L 的高锰酸钾溶液的毫升数表示。M ＝（V2 － V1）×T/g。式中：M 为土壤过氧化氢酶活性值；V1 为样品消耗的 0.1 mol/L 的高锰酸钾溶液的毫升数；V2 为对照消耗的 0.1 mol/L 的高锰酸钾溶液的毫升数；T 为 0.1 mol/L 的高锰酸钾溶液滴定的矫正值；g 为土重。
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脲酶活性测定：按照孙瑞莲[27]的方法测定土壤脲酶活性。土壤脲酶活性以每百克土 NH3 － N 的毫克数表示。M ＝（X1 － X2 － X3）×100×10。式中：M 为土壤脲酶活性值；X1、X2、X3 分别为样品、无土对照、无基质对照试验的光密度值在标准曲线上对应的 NH3-N 的毫克数；100 为样品溶液体积与测定样品体积之比值；10 为酶活性单位的土重与样品土重之比值。
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2 结果与分析
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2.1 菌株 37402 对大蒜根腐病拮抗效果研究
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以实验室前期从山东省金乡县连作大蒜根际土分离获得的暹罗芽孢杆菌 37402-1 为研究对象，以两株大蒜病原真菌尖孢镰刀菌 ACCC36464 和拟枝孢镰刀菌 ACCC37402 为对峙菌株，经过两点对峙试验，从大蒜根际细菌中得到拮抗菌株 37402-1。其对根腐病原菌 ACCC36464 有拮抗效果，抑菌率为 37.98%； 对根腐病原菌 ACCC37402 有拮抗效果，抑菌率为 52.70% （图1）。
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2.2 菌株 37402-1 的分子生物学鉴定
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以菌株 37402-1 的总 DNA 为模板，采用 16S rDNA 通用引物 27F 和 1492R 进行 PCR 扩增并测序。测序结果在数据库（http：//ezbiocloud.net/）比对，结果显示与菌株 37402-1 的 16S rDNA 基因相似度最高的菌株为暹罗芽孢杆菌 KCTC 13613T （AJVF01000043），最高相似度达 100%，与其余菌株的相似度低于 99.93%。采用邻接法构建菌株 37402-1，9 株与其相似度高的芽孢杆菌属菌株的 16S rDNA 基因序列系统发育进化树（图2），结果显示菌株 37402-1 与其 16S rDNA 基因序列最高相似度菌株暹罗芽孢杆菌 KCTC 13613T （AJVF01000043）位于同一分支，说明它们具有高度同源性。经过 16S rDNA 基因序列分析，可将菌株 37402-1 鉴定为暹罗芽孢杆菌。
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图1 拮抗菌 37402-1 对病原菌 ACCC37402 菌株的拮抗作用
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图2 菌株 37402-1 与其基因相似度最高的 9 株菌的系统发育进化树
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注：Rossellomorea oryzaecorticis 为外源菌株。
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2.3 菌株暹罗芽孢杆菌 37402-1 的功能特性研究
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菌株暹罗芽孢杆菌 37402-1 可以在蛋白酶检测平板上形成水解透明圈，说明其具有水解蛋白能力。菌株暹罗芽孢杆菌 37402-1 在 CAS 蓝色平板中形成橘黄色透明圈，说明其具有产铁载体的能力。菌株暹罗芽孢杆菌 37402-1 在有机磷培养基和无机磷培养基上均能水解产生透明圈，说明其具有有机磷和无机磷水解能力。综上所述，菌株暹罗芽孢杆菌 37402-1 具有多种促生特性。
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图3 菌株暹罗芽孢杆菌 37402-1 水解蛋白（a）、产铁载体（b）、溶解有机磷（c）和无机磷（d）能力
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2.4 温室条件下菌株暹罗芽孢杆菌 37402-1 对大蒜幼苗促生能力研究
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接菌 40 d 后收获大蒜，分别测定大蒜的株高、茎粗、根长、根鲜重、株鲜重、株干重，结果显示（表1）：菌株暹罗芽孢杆菌 37402-1 对大蒜有显著促生效果，茎粗、株高和根鲜重指标比对照均有显著提高（P<0.05），其中茎粗增长 13.36%； 株高增长 13.01%；根长增长 15.56%；根鲜重增长 35.65%。
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注：同一列中不同字母代表处理之间存在差异（P<0.05，n=10）。
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2.5 田间条件下菌株暹罗芽孢杆菌 37402-1 对大蒜产量和土壤酶活性的影响研究
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2.5.1 暹罗芽孢杆菌 37402-1 对大蒜田间产量的影响
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由表2 可以看出，施用了微生物菌剂后，大蒜的产量与对照相比均有增加，施用 37402-1 与对照相比产量提高 12.78%。
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2.5.2 暹罗芽孢杆菌 37402-1 对土壤酶活性的影响
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根据大蒜测产结果，选择暹罗芽孢杆菌 37402-1 菌剂处理土壤与对照土壤进行土壤酶活性的测定，结果如表3 显示：菌剂 37402-1 处理后土壤蔗糖酶活性为 28.418 U/g，约为对照土壤的 1.19 倍。对照土壤的过氧化氢酶活性最强，消耗高锰酸钾的体积为 0.218 mL；菌剂 37402-1 处理后土壤过氧化氢酶活性次之。菌剂 37402-1 处理后土壤脲酶活性较强，为 276.607 U/g，高于对照土壤的 258.284 U/g。
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3 结论与讨论
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3.1 暹罗芽孢杆菌 37402-1 对大蒜病原真菌的拮抗效果
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PGPR 广泛存在于多种植物的根际，其主要种类包括芽孢杆菌属、假单胞菌属（Pseudomonas） 等。Guo 等[28] 发现芽孢杆菌属、假单胞菌属和沙雷氏菌属的植物根际促生细菌的对番茄枯萎病具有较好的抗病防效。刘艳霞等[29]前期筛选 PGPR 菌株 8 株，其中枯草芽孢杆菌（B. subtilis） LX4 CGMCC No.8265、解淀粉芽孢杆菌（B. amyloliquefaciens）Ba-S CGMCC No.8262、解淀粉芽孢杆菌 LX7 CGMCC No.8267 可利用多种碳源对烟草青枯劳尔氏菌（Ralstonia solanacearum）CP002819 具有较强的拮抗作用。Solanki 等[30]分离得到的解淀粉芽孢杆菌 MB101 和枯草芽胞杆菌 MB14 可有效减少立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）病害。目前有关大蒜 PGPR 拮抗效果的研究，崔北米等[31]从大蒜鳞茎中分离得到的菌株 B. axarquiensis DSP6 对 9 种病原真菌均具有较强的抑菌作用。本研究从大蒜根际土中分离筛选获得的细菌暹罗芽胞杆菌 37402-1 对大蒜根腐病病原真菌尖刀镰孢菌 ACCC37402 和拟枝孢镰刀菌 ACCC36464 拮抗效果明显。
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3.2 暹罗芽孢杆菌 37402-1 的温室促生、拮抗效果
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PGPR 菌株的抗病促生功能在农业生产中具有较好的应用前景，能够抑制病原菌的繁殖或为植物提供营养物质促进植物生长。近年来，研究热点多集中于同时具有多种促生抗病功能的 PGPR 菌株。 Mailk 等[32]研究发现具有固氮、溶磷、产生植物激素和分泌抗生素能力的细菌、蓝细菌均能促进植物生长。通过分离白芷根际 PGPR 菌株，江美彦等[33] 发现同时具有固氮、溶磷、产吲哚乙酸（IAA）功能的克雷伯氏菌属（Klebsiella）菌株 XI-1 促生潜力最强，可显著提高白芷产量。张静等[34]从土壤中分离 12 株同时具有分解无机磷和有机磷的细菌，并通过盆栽试验发现其均对黄瓜植株有明显的促生作用。本团队前期从大蒜根部分离菌株 Bacillus sp.DD3，并通过温室盆栽试验证明该菌株对大蒜根腐病有较好的拮抗效果，同时可以显著促进植物生长。高亚慧等[35]研究发现其分离的橙色微杆菌 （Microbacterium aurantiacum）GX14001 具有较强的溶有机 / 无机磷能力和一般固氮能力，产 IAA 能力较弱，并证明菌株对植物有明显促生作用。本研究菌株暹罗芽孢杆菌 37402-1 具有拮抗 2 种大蒜土传病害病原菌能力、有机磷 / 无机磷水解能力、水解蛋白能力、产铁载体能力等多种 PGPR 特性，并通过温室盆栽试验证实其对大蒜幼苗有显著的促生作用，这与之前的研究结果相符。
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3.3 暹罗芽孢杆菌 37402-1 的田间促生效果
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对微生物菌种促生能力的研究不仅包括实验室条件下的 PGPR 功能特性研究、温室盆栽条件下对作物生长促生能力研究，还进一步开展了对田间作物的促生能力研究。王豹祥等[36]利用复合 PGPR 菌肥处理烤烟，使净产值增加 28.1%，并提高了烤烟的外观质量。张德刚等[37]使用 PGPR 制成菌剂对田间条件下辣椒进行灌根处理，结果发现辅施 PGPR 提高了辣椒的产量。本研究结果显示，田间条件下施加暹罗芽孢杆菌 37402-1 菌剂使大蒜产量增加 12.78%。微生物是土壤养分转化和循环的动力，施加具有特定功能的微生物菌剂能够改善土壤营养状况[38]。马慧媛等[39]发现施用微生物菌剂可增加土壤全氮、有效磷和速效钾等含量。肖力婷等[40]使用微生物菌剂处理蜜桔，研究发现其根际土壤有机质、全氮、全磷、有效磷、速效钾等指标相较于对照均有不同程度提高。赵娟等[41]使用黑曲霉菌剂处理西瓜根际土壤，分析表明土壤 pH 及全氮、有效磷、速效钾含量显著提高（P<0.05）。杨丽娟等[42]研究发现产酸克雷伯氏菌可提高土壤酶活性、促进玉米幼苗的生长并提高玉米的耐盐碱能力。土壤蔗糖酶与土壤中有机质、氮、磷含量，微生物数量及土壤呼吸强度有关。土壤的过氧化氢酶活性与土壤的通气性和土壤微生物的活动相关，在一定程度上反映了土壤微生物学过程的强度[43]。脲酶是一种酰胺酶，能水解土壤中有机质分子中的肽键。土壤脲酶的活性与土壤中的微生物数量及有机质含量呈正相关[44]。本试验在田间条件下研究大蒜促生菌暹罗芽孢杆菌 37402-1 的促生效果并分析土壤酶活性，探索菌株的实际促生效果和对土壤活性的影响，发现暹罗芽孢杆菌 37402-1 菌剂可以提高大蒜产量，并提高土壤酶活性即提高土壤蔗糖酶和土壤脲酶活性、降低土壤过氧化氢酶活性，这可能是其促进大蒜生长和增加大蒜产量的机制之一，为该菌株在农业产业中的应用提供理论支撑。
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摘要
大蒜（Allium sativum L.）是我国的重要经济作物，主产地连作障碍严重，其种植生产的持续性受到制约。植物根际促生菌（PGPR）能够促进植物生长、防治病害且对环境友好。研制高效防控大蒜土传病害的微生物肥料对我国大蒜产业可持续发展和绿色发展有着重要的生态学和现实意义。以实验室前期从山东省金乡县连作大蒜根部分离的细菌为供试菌株，筛选获得对大蒜根腐病病原真菌尖刀镰孢菌（Fusarium oxysporum）ACCC37402 和拟枝孢镰刀菌（Fusarium sporotrichioides）ACCC36464 具有较好拮抗效果的菌株 37402-1。菌株 37402-1 的 PGPR 功能特性研究结果显示：对大蒜根腐病病原真菌 ACCC37402 和 ACCC36464 的抑菌率分别为 52.70% 和 37.98%；经 16S rDNA 基因序列同源性分析，确定为暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis）；具有水解蛋白能力、产铁载体能力、溶解有机磷和无机磷的能力。温室盆栽试验显示，接种暹罗芽孢杆菌 37402-1 菌悬液能够促进大蒜幼苗的生长。田间试验表明，接种暹罗芽孢杆菌 37402-1 菌剂使大蒜增产 12.78%，并改变土壤酶活性（提高土壤蔗糖酶和土壤脲酶活性，降低土壤过氧化氢酶活性）。菌株暹罗芽孢杆菌 37402-1 兼具多种功能特性，对大蒜根腐病具有较好的拮抗效果，同时可以显著促进大蒜幼苗生长，并可在大田条件下促进大蒜的单产，有望开发成为高效的微生物肥料生产菌种。
Abstract
Garlic（Allium sativum L. ）is an important cash crop in China，but its planting and production sustainability is restricted due to serious continuous cropping obstacles in the main producing area. Plant growth promoting rhizobacteria （PGPR）can promote plant growth，control disease and promote the environment. It is of great ecological and practical significance for the sustainable development and green development of garlic industry to develop efficient microbial fertilizer for the prevention and control of garlic soil-borne diseases. The bacteria isolated from the root of continuous cropping garlic in Jinxiang county，Shandong province was used as the test strains. The antagonistic strains of Fusarium oxysporum ACCC37402 and Fusarium sporotrichioides ACCC36464，which were the the pathogen fungi of garlic root rot，were screened. The preliminary identification and functional identification of the selected strains were carried out. The effect of multifunctional bacterial suspension on the growth of garlic seedlings and the effect of disease resistance were studied by pot experiment in greenhouse. Strain 37402-1 had good antagonistic effects against ACCC37402 and ACCC36464，with antibacterial rate of 52.70% and 37.98%. Bacillus siamensis was identified as a strain based on the sequence homology of 16S rDNA. The results of other functional studies showed that Bacillus siamensis 37402-1 had the ability to hydrolyze protein，produce iron carrier and dissolve organophosphate and inorganic phosphorus. Pot experiments in greenhouse showed that Bacillus siamensis 37402-1 suspension inoculated could promote the growth of garlic seedlings. Field experiments showed that Bacillus siamensis 37402- 1 inoculated with it increased garlic yield by 12.78% and changed soil enzyme activities（increasing soil sucrase and urease activity，and reducing soil catalase activity）. Bacillus siamensis 37402-1 has multiple functional characteristics，and has good antagonistic effects against garlic root rot. At the same time，Bacillus siamensis 37402-1 can significantly promote the growth of garlic seedlings and improve the yield of garlic under field conditions. It is expected to be developed as an efficient microbial fertilizer production strain.